1、定义:连续灭菌也叫连消,将配制好的并经预热(60~75℃)的培养基用泵连续输入由直接蒸汽加热的加热塔,使在短时间内达到灭菌温度(126~132℃)。然后进入维持罐(或维持管),使在灭菌温度下维持3~7分钟后再进入冷却管,使其冷却至接种温度并直接进入已事先灭菌(空罐灭菌)过的发酵罐内。其温度一般以126~132 ℃为宜,总蒸汽压力要求达到0.044~0.049 MPa以上。
培养基采用连续灭菌时,需在培养基进入发酵罐前,直接用蒸汽进行空罐灭菌(空消),用无菌空气保压,待培养基流入罐后,开始冷却。灭菌时对培养基的加热可采用各种加热器。
培养基的冷却方式有喷淋冷却式、真空冷却式、薄板换热器式几种方式,其过程均包括加热、维持和冷却阶段。
2、连续灭菌的流程:
(1)由热交换器组成的灭菌系统
流程中采用了薄板换热器作为培养液的加热和冷却器,蒸汽在薄板换热器的加热段使培养液的温度升高,经维持段保温一定时间后,培养基在薄板换热器的冷却段进行冷却,从而使培养基的预热、加热灭菌及冷却过程可在同一设备内完成。该流程的加热和冷却时间比喷射加热连续灭菌流程要长些,但由于在培养基的预热过程同时也起到了灭菌后培养基的冷却,因而节约了蒸汽和冷却水的用量。
(2)蒸汽直接喷射型的连续灭菌系统
流程中采用了蒸汽喷射器,它使培养液与高温蒸汽直接接触,从而在短时间内可将培养液急速升温至预定的灭菌温度然后在该温度下维持一段时间灭菌,灭菌后的培养基通过一膨胀阀进入真空冷却器急速冷却,从图中可以看出,由于该流程中培养基受热时间短,营养物质的损失也就不很严重,同时该流程保证了培养基物料先进先出,避免了过热或灭菌不*等现象。
(3)由连消塔、维持罐和喷淋冷却组成的灭菌系统
培养基连续灭菌的基本设备一般包括:
①配料预热罐,将配制好的料液预热到60-70℃,以避免连续灭菌时由于料液与蒸汽温度过大而产生水汽撞击声;
②连消塔,连消塔的作用主要是使高温蒸汽与料液迅速接触混和,并使料液的温度很快升高到灭菌温度(126-132)℃;
③维持罐,连消塔加热的时间很短,光靠这段时间的灭菌是不够的,维持罐的作用是使料液在灭菌温度下保持5-7min,以达到灭菌的目的;
④冷却管,从维持罐出来的料液要经过冷却排管进行冷却,生产上一般采用冷水喷淋冷却,冷却到40-50℃后,输送到预先已经灭菌过的罐内。