荧光抗体操作过程为何要避光?
(1)生物化学反应需要酶的催化作用,所以荧光素在荧光素酶和ATP等物质的参与下可进行反应发出荧光.ATP是生命活动能量的直接来源,发光强度与ATP的含量成正比,所以根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量。
(2)影响酶活性的外界因素有温度和pH,其中维持溶液pH的相对稳定时常常使用缓冲液.分光光度计反应室内发生的能量转换是ATP中活跃的化学能转化为光能。
(3)荧光素酶浓度不同,但发光强度相同,由于受ATP数量限制,发光强度也不再增加。
(4)每个细菌细胞中ATP的含量大致相同且相对稳定,可以根据样品中细菌的ATP总含量,测算出细菌的数量。