cck8检测试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗cck8检测试剂盒抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的试剂盒与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗cck8检测试剂盒抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗cck8检测试剂盒抗体与结合在包被抗体上的试剂盒结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，cck8检测试剂盒浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中试剂盒的浓度。

　　cck8检测试剂盒检测前准备工作：

　　1.请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。

　　2.将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1：25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，可用40℃水浴微加热使结晶溶解后再配制洗涤液（加热温度不要超过50℃，使用时洗涤液应为室温）。当日使用。

　　3.标准品：于10000×g离心1分钟，加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中，旋紧管盖，静置10分钟，上下颠倒数次，待其充分溶解后，用移液器将其轻轻混匀（浓度为1000pg/mL）。然后根据需要进行倍比稀释（注：不要直接在反应孔中进行倍比稀释）。建议配制成以下浓度：按照稀释方法图例标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品：取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中，混匀即可，其余浓度依此类推。

　　4.生物素化抗体工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟，以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1：100)成工作浓度。当日使用。

　　5.酶结合物工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。cck8检测试剂盒使用前15分钟，以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1：100)成工作浓度。