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新品上市丨Bioss助您解决“胶”虑 WB条带更加清晰
更新时间:2023-05-16      阅读:506


“梯度胶的各种试剂浓度让人头晕眼花;
一次配四块胶,手忙脚乱一上午时间就过完了;

可以保温杯里泡枸杞,却拯救不了配胶试剂影响身体;

辛辛苦苦制完胶,怎么又出现漏胶/凝胶太慢/胶孔残缺,今天又要加班了;
条带歪歪扭扭,难入导师法眼,唉,又要重新来过。"
这是不是也是你在做WB时的感叹?
快来看看Bioss全新推出的Precast Gels (Bis-Tris, MOPS)蛋白预制胶Bioss助您解决“胶"虑,让WB条带更加清晰。



产品信息:

本产品为Bis-Tris聚丙烯酰胺电泳预制凝胶,可用于蛋白质分离实验,单片胶为15孔,每孔最大上样量为25 μl推荐上样量10-15 μl。凝胶缓冲配方使蛋白电泳条带更为清晰,锐利,均匀,分辨率更高;配套的MOPS Running Buffer为中性缓冲液,可以提高凝胶稳定性,并避免蛋白在电泳过程中的再修饰。

(注:电泳推荐使用配套赠送的MOPS running buffer,对于小分子量蛋白,也可使用MES缓冲液。请勿使用Tris-Glycine Running Buffer代替,电泳缓冲液反复使用次数建议不超过3次)


预制胶选择指南

在蛋白实验中,通常使用固定浓度胶梯度胶两种,与固定浓度胶相比,显然梯度胶具有更大优势。首先,梯度胶的分离范围更宽,可以同时分离较大范围分子量的蛋白质。梯度胶的顶部孔径较大,底部孔径较小分子量较大的蛋白质可以在凝胶顶部大孔径部分得到分离,同时分子量较小的蛋白质可以在凝胶底部小孔径部分得到分离。

另一个优点是梯度胶可以分辨分子量相差较小,在固定浓度胶中不能分辨的蛋白质。电泳过程中,蛋白质在梯度胶中迁移,经过的孔径越来越小,直到凝胶的孔径不能通透,这样电泳过程中蛋白质就被浓缩,集中在一个很窄的区带中。而分子量略小的蛋白质可以迁移得更靠前一些,被集中在略前面的区带中。由于梯度凝胶孔径逐步变小,在蛋白质不能通透的孔径附近对蛋白有浓缩作用,所以电泳后形成很窄的区带,可以分辨出分子量相差较小的蛋白质。

在蛋白分离范围相同的情况下,梯度胶的选择主要取决于目的蛋白的大小,虽然都可以分离10-250 kD的蛋白,但浓度为4-12%的梯度胶对55 kD以上的蛋白分离效果更好,而浓度为4-20%的梯度胶则更利于分离55 kD以下的蛋白。

凝胶分离范围






产品优势及

常见问题解答

 产品优势:

1.方便:即开即用,无需配制溶液和灌胶操作,附送足量的电泳缓冲液,简化操作步骤,缩短实验时间,每天都有新结果;

2.快捷:电泳时间短,在150V电压下,电泳40-50分钟即可完成,再也不用熬夜做WB啦;

3.安全:无需接触有毒、刺激性试剂,和屏住呼吸加试剂say byebye;

4.兼容性强:兼容目前市场各种电泳槽,无论是BIORAD,天能还是君意东方,通通百搭;

5.应用广泛:SDS变性及非变性电泳一胶搞定;

6.重复性好:通过全自动、大规模的凝胶灌注技术,品质稳定,保证每片胶之间良好的重复性,重复实验补数据也不怕;

7.结果清晰:凝胶缓冲配方使蛋白电泳条带更为清晰,锐利,均匀,分辨率更高;配套的MOPS Running Buffer为中性缓冲液,可以提高凝胶稳定性并避免蛋白在电泳过程中的再修饰。条带平整、清晰、锐利,无边缘效应,让你的WB结果张张精品。


 常见问题解答:

1.指示剂偏斜

可能原因:电泳槽漏液

解决办法:调整胶板位置,检查密封条。

2.蛋白条带拖尾

可能原因:样品溶解不佳或者降解

解决办法:样品加热,离心取上清或重新制备新鲜样品

3.指示剂呈倒三角状,即两边低、中间高,形成峰顶

可能原因:内、外槽电泳液量不够

解决办法:补满内槽电泳液,外槽电泳液补至2/3高度

4.指示剂出现弧度

可能原因:底部出口被电泳槽上胶条部分覆盖或者胶板底部没卡紧

解决办法:调整胶板位置,避免底部出口和胶条重合

5.上半部分蛋白条带无端消失

可能原因:内槽或样品被蛋白酶污染

解决办法:清洗实验相关试剂、仪器,避免被蛋白酶污染。

6.WB曝光图蛋白条带不完整

可能原因:湿转时海绵里面有气泡没有排干净或者夹子没夹紧

解决办法:将海绵里面的气泡排干净;调整夹子的位置。

7.样品条带在凝胶中扩散状

可能原因:样品含盐类过多

解决办法:采用透析或者超滤除盐。




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