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DAB显色试剂盒(20×)
保存条件 Store at –20℃.DAB,即3,3’-二氨基联苯胺(3,3’-diaminobenzidine)是辣根过氧化物酶(Peroxidase)的常用生色底物,在过氧化氢的存在下失去电子而呈现出颜色变化,形成浅棕色不溶性产物。用于检测过氧化物酶的活性,它灵敏度高,特异性好,是HRP结合物常用的底物,常在免疫组化,原位杂交,Western blot等膜显色或检测细胞或组织内源性的过氧化物酶中应用广泛。
DAB显色试剂盒(20×)
用法:
1. 临用前配制 10 mL 1×DAB 显色工作液:将 0.5 mL 20× DAB 显色液 A 加入 9 mL 1×PBS 中并涡旋混匀。向 DAB / PBS 混合物中加入0.5 mL 20×DAB显色液B涡旋混合均匀。 可以根据需要按比例缩放体积。 注意:不要使用含有Sodium Azide的缓冲液,Sodium Azide是一种HRP抑制剂。
2. 在样品的最后一次洗涤完毕后,去除洗涤液,加入足够 的 DAB 显色工作液,确保能充分覆盖样品。室温避光孵育 3-30 分钟或更长时间,直至显色达到预期深浅。免疫印迹实验,应保证样品在一个足够多的染色液中且能被自由晃动。
3. 去除 DAB 染色工作液,用 PBS 冲洗样品几次以中止显色反应。对于用显微镜观察的细胞或组织样品,可复染样品(可选)并安装在水性封固介质中。或者,可以将样品脱水并安装在有机封固剂中。免疫印迹实验,可将样品用水冲洗,风干,然后在室温下储存。
储存与运输:
-20℃避光密闭保存,一年有效。避免反复冻融。
2~8℃运输,在途时间5天对试剂无影响。
注意事项
1. DAB对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
2. 显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用。
3. 显色时间严格控制,根据情况调整,以免显色过度。固相膜显色数小时后即会褪色,不能Permanent存在。
4. 请将沾有DAB显色液A的容器等放在含有3% KMnO4,2% NaHCO3 的溶液浸泡3h,以减少污染。
5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。