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蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物, 100×)
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蛋白酶抑制剂(Protease Inhibitor)是指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合,使蛋白酶活力下降、甚至消失、但不使酶蛋白变性的物质。蛋白酶抑制剂有很多种,包括 EDTA、E-64、NaVO3、Bestatin、Leupetin、PepstatinA、Aprotinin 等,均可分别抑制胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、胃蛋白酶、金属蛋白酶等各种蛋白酶的活性,从而有效地抑制蛋白质的降解,并维持原有的蛋白结构。
哺乳动物细胞或组织提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
Bioss生产的蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物, 100×) (Protease inhibitor cocktail for mammalian cell and tissue extracts, 100×) 是一种用于哺乳动物细胞或组织蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物,主要成分有:105mM AEBSF, 80uM Aprotinin, 5mM Bestatin, 1.5mM E64, 2mM Leupeptin and 1.5mM Pepstatin A in DMSO,并提供一支独立包装的0.5M EDTA, pH 8.0,以便选择性使用。
注:如果所提取的蛋白质用于检测金属蛋白酶活性,则不宜添加EDTA。
本产品为100×浓缩液,使用时请按1:100的比例加入裂解液中,用于哺乳动物细胞或组织蛋白的提取,可有效抑制蛋白降解。该产品可以抑制绝大多数蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱胺酸蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等。所提取的蛋白质可以用于 Western Blot、免疫共沉淀等试验。
不同类型的蛋白提取物中含有不同类型的蛋白酶。例如,哺乳动物细胞提取物中通常含有高丰度的丝氨酸蛋白酶,细菌细胞提取物通常含有较多的丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶,哺乳动物组织提取物中主要含有丝氨酸、半胱氨酸和金属蛋白酶,植物提取物中常含有大量的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶,还有一些含有天冬氨酸蛋白酶。为此Bioss针对不同类型样品的蛋白提取,提供了不同类型的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂混合物以供选择。
本产品仅用于科研领域,不用于临床诊断。