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DiD 高氯酸盐 (细胞膜红色荧光探针)
保存条件 Store at -20℃, protect from light.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)和 DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分别用标准的 FITC和TRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。 DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。
DiD perchlorate
CAS号:127274-91-3
纯度:>95%
Ex/Em: 644/663nm 推荐滤光器(Filter): XF47-Omega, 31023-Chroma
储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
溶解性:可溶于无水乙醇、DMSO和DMF,其中在DMSO中溶解度大于10mg/ml。发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。
DiD 高氯酸盐 (细胞膜红色荧光探针)
使用方法
1. DiD,DiO,DiI,DiR和DiS细胞膜染色液制备
(1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。
注意:未使用的储存液保存在-20 oC,避免反复冻融。
(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 µM的工作液。
注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
2. 悬浮细胞染色
(1)悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。
(2)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(3)染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。
(4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。
(5)重复(3),(4)步骤两次以上。
3. 粘壁细胞的染色
(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
4. 显微镜检测
(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
(2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:
a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005
5. 流式细胞仪的检测
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。
关于我们
Bioss(博奥森)于2001年在北京成立,是一家拥有自主品牌,集免疫学科研试剂研发、生产、销售为一体的国家高新技术企业。自成立之初,公司始终秉持“自主研发、原始创新"的经营理念,为生命科学研究提供高质量的科研抗体,诊断抗体原料,免疫学辅助试剂,以及CRO服务。
Bioss Inc.于2010年在美国波士顿设立了面向全球抗体市场的商务拓展及国际市场营销总部,不断扩展全球销售体系,主打Bioss国际品牌,向全球科研工作者提供高质量的科研抗体产品。迄今为止,Bioss产品已遍布全球多个国家和地区,并已成为数家欧美抗体公司的OEM合作伙伴。
二十年的探索和拼搏,为Bioss品牌在免疫学试剂领域奠定了坚实的基础。我们在美国、中国、德国、日本分别建有现货库存,为生命科学研究提供更及时的服务。
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作为一家抗体及相关产品的生产商和供应商,公司现拥有近20000+种抗体产品,涵盖人蛋白靶点14000多个。特色产品有特异磷酸化抗体及授权AF荧光标记抗体等。此外,公司还提供完善的单/多克隆抗体制备、标记、重组蛋白、多肽合成及各项免疫学检测技术服务等。
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