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意义:烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是一种参与多种氧化还原反应的酶辅因子(辅酶Ⅰ)。NAD作为电子载体,在氧化态(NAD)和还原态(NADH)之间循环。除了在氧化还原反应中的作用外,NAD在ADP核糖基化反应中起着关键作用,并且是sirtuins的底物。辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。NAD参与细胞物质代谢、能量合成、细胞DNA修复等多种生理活动,对机体免疫能力有重要作用。NADH 在维持细胞生长、分化和能量代谢以及细胞保护方面起着重要作用。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和 TCA 循环的强弱。较高的 NAD(H)及 NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA 循环。
原理:分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NAD+和 NADH,NADH 通过 PMS 的递氢作用,还原 氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在 570nm 下检测吸光值;而 NAD+可被乙醇脱氢酶还原为 NADH,进一步采用 MTT 还原法检测。