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意义:烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯(NADP)是一种酶促辅因子,参与许多氧化还原反应,在还原态(NADPH)和氧化态(NADP)之间循环。NADP还参与生物合成反应,如脂质和核酸的合成,在那里它作为还原剂发挥作用。戊糖磷酸途径(PPP)的氧化分支是动物细胞产生NADPH的主要来源。辅酶ⅡNADP (H) 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NADP+和 NADPH 含量测定可以计算 NADP(NADPH + NADP+ )含量和 NADPH/NADP+比值,其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一,而且在 PPP 途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。
原理:分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NADP+和 NADPH。NADPH 通过 PMS 的递氢作用, 使氧化型噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm 下检测吸光值,从而测定 NADPH 含量。利用 6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原 NADP+为 NADPH,从而检测 NADP+含量。